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仪表网 仪表研发】微藻是地球上代谢功能较为多样化的生物类群,在全球碳循环中发挥关键作用,也是生物技术产业中重要的一类光合细胞工厂。但微藻的种质鉴定和代谢功能检测繁琐,且自然界大部分微藻难以培养。近日,中国科学院青岛能源研究所单细胞中心发表了微藻拉曼组数据库,并结合机器学习示范了单细胞精度、快速的微藻种类鉴定和代谢功能表征。该技术为微藻细胞工厂的高效挖掘和筛选提供了一个免培养、高通量的强有力手段,相关研究成果发表在《分析化学》上。
微藻是在自然界中广泛存在的单细胞光合自养生物,可将空气中的二氧化碳高效转化为油脂、碳水化合物、蛋白质和色素等高附加值产品,应用于第三代生物燃料、饲料、食品和保健品等。因此,“微藻细胞工厂”有望成为服务“碳中和”和“碳达峰”的低碳制造解决方案之一。这一前景的前提和基础是微藻种质资源的快速鉴定和代谢功能检测,然而,传统上“先养后筛”的种质筛选策略面临着诸多瓶颈。
为此,中科院青岛能源所单细胞中心Mohammadhadi Heidari Baladehi等人开发出基于拉曼组的藻类细胞快速辨别与代谢功能快检技术。拉曼组是一个细胞群体的单细胞拉曼光谱的总称,代表着可以在单细胞精度快速、低成本、高通量获取的细胞群体实时代谢状态。首先,针对已获纯培养的藻种,研究人员采集了色素分子拉曼光谱(PS)和微藻细胞自身拉曼光谱(WS)这两张谱图,构建了藻类拉曼组数据库。该数据库包含了在不同生长期(稳定期和指数期)、分属27个微藻种属的超过9000个单细胞的拉曼光谱。该团队开发的机器学习算法,通过PS和WS的联用辨别待测单细胞的藻种和生长状态,准确率可达97%。其次,针对环境中难培养的藻类细胞,研究人员借助前期发明的单细胞拉曼分选技术来捕获活性藻类单细胞,采集其PS和WS这两张拉曼谱图,进而结合下游单细胞测序,建立了环境中微藻单细胞代谢表型组和基因型的关联。该方法不需分离培养,即可构建环境中任何微藻细胞的拉曼光谱数据库,进而基于机器学习,支撑尚难培养藻种的快速鉴定和代谢功能检测。此外,除了种质辨别,单细胞拉曼光谱还能揭示微藻利用二氧化碳后的碳源存储形式(如油脂、淀粉、蛋白、色素等),及其含量和化学性质(如油脂的不饱和度等)。这些代谢表型信息,对于快速评估微藻种质的培养工艺、经济价值和应用潜力十分重要。
与传统上依赖于培养的“先养后筛”的策略不同,这一基于拉曼组的种质筛选策略无需培养与扩繁细胞,节约了大量时间和人工,并能挖掘和筛选尚难培养的微藻细胞。针对每个微藻细胞,拉曼光谱的采集通常仅需数秒的时间,且无需破坏细胞,故而步骤简洁、分析通量高、易于实现自动化,还能在单细胞精度同时探测从代谢表型组到基因组的全面信息。因此,该技术将加速微藻细胞工厂及其代谢产物的挖掘与利用。
此次微藻拉曼组数据库及其机器学习手段的发表,将加速新一代微藻资源信息平台的构建和共享,促进藻类为“双碳行动”做出贡献。研究工作得到科技部、国家自然科学基金委员会、中科院、山东能源研究院、青岛海洋科学与技术试点国家实验室等的支持。
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