岛津云学院-课后答疑系列 液相色谱篇
- 2020/3/11 10:38:25 30338
- 来源：岛津
【仪表网 仪表科普】“岛津云学院”系列开播以来，得到了众多用户的观看和支持。在直播互动交流中，收到了很多提问，岛津十分重视各位用户提出的问题，今天将开启岛津云学院答疑系列，为大家作详细解答！
★请问老师一般液相废液怎么处理？
答：需要明确的是，液相色谱的废液中含有大量的有机溶剂以及所测试的样品，大部分情况下是有毒有害的，因此不能直接倾倒至环境中，或者流入实验室下水道中，需要集中处理。一般而言，可以根据不同的情况进行处理：
1、如果废液量较少：如分析型色谱的废液，可先行收集，然后等待集中处理(尤其是含有剧毒成分的)，比如寻找专业的废液回收机构；如果所在单位/机构不支持集中处理，则可以找安全的地方焚烧或填埋(含酸的需用废碱中和，含盐的可以直接倒掉)。
2、废液量很大：如制备色谱的废液，则考虑通过精馏系统，将废液分馏后再次使用。
3、也可以通过“循环阀”，将未污染的流动相再次回收利用。如岛津针对分析型液相和制备型液相都可以提供相应的“溶剂循环阀”，将分析过程中未受到污染的流动相，如色谱峰之间平直的基线(于等度条件下)回收至溶剂瓶中，将能够大大提升溶剂使用效率，降低实验室成本。
★新买色谱柱如何进行测试？
答：对于液相色谱柱来讲，拿到一根新的色谱柱，先测柱效、拖尾因子、柱压(减去系统压力)，并记录结果。
之后使用过程中应定期测试，追踪色谱柱性能。因不同类型色谱柱差别较大，因此对于所使用的方法，请根据说明书上的液相条件和测试样品进行，同时需要确保仪器的状态正常。
★色谱柱用什么冲洗？
答：反相与正相体系清洗方式有所不同：
反相色谱柱
1、日常清洗：10%甲醇水(去除极性大的杂质)→纯甲醇(去除非极性杂质)。
2、流动相中含有离子对试剂：50%有机溶剂(10倍柱体积)??%有机溶剂(20倍柱体积)?%有机溶剂(20倍柱体积)→保存。
3、生物样品(蛋白质/多肽)污染的色谱柱：B 5% →B 100%的梯度洗脱×3次(A：0.1%TFA B：0.1%TFA in CH3CN)?%有机溶剂(20倍柱体积)→保存。
正相色谱柱
亲水性杂质吸附太强，常规清洗效果不明显，可以逐级增加洗脱强度，每级至少确保10倍柱体积。
I级：100%正己烷
II级：100%乙酸乙酯
III级：50%三氯甲烷-50%甲醇
注意：回归到初流动相条件时，请务必先用异丙醇过渡。
★用反相色谱的液相系统可以跑正相吗？刚刚老师提到用异丙醇冲洗管路，那我跑完反相的用异丙醇冲洗是不是就可以跑正相了？
答：一般来讲，当把一台液相色谱仪即当作正相色谱用，也当做反相色谱用的时候，在两个不同分析模式之间切换时需要用异丙醇做充分的过渡(比如通宵低流速异丙醇冲洗管路)，其主要是利用异丙醇可以分别与正/反相溶剂互溶的特性，避免流动相残留造成的影响。
但有一点需要注意的是，所使用的液相色谱仪是否适用于正相溶剂。通常液相色谱仪的主要设计目的是适用于反相体系使用，因此在使用正相体系前，好与供应商确认，尤其是使用特殊溶剂前(如HFIP，DMF等)。
全部评论