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《水中微生物含量的测定 三磷酸腺苷(ATP)生物发光法》团体标准征求意见

2024/2/12 8:48:39    25485
来源:仪表网
摘要:本标准中的“微生物”是指具有细胞结构的微生物,如细菌、真菌、藻类和原生动物等。本标准规定了测定水中微生物三磷酸腺苷(ATP)的生物发光法。
  【仪表网 行业标准上海市净水技术学会发布了团体标准《水中微生物含量的测定 三磷酸腺苷(ATP)生物发光法》征求意见稿,现予征求意见。意见反馈邮箱:50706127@qq.com。
 
  为贯彻《关于加强城市供水安全保障工作的通知》(建办城〔2022〕41 号),提高供水突发污染应对能力,加强水厂精细化管理,保障供水生物安全,规范水中微生物三磷酸腺苷(ATP)的测定,为《上海市城市总体规划(2017-2035 年)报告》中“全市供水水质达到国际先进标准,满足直饮需求”提供技术支撑,编制组经广泛调查研究,并在充分征求意见的基础上,制定本标准。
 
  本标准参照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第 1 部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。
 
  本标准起草单位:上海浦东水务(集团)有限公司、东方国际集团上海环境科技有限公司、上海南汇自来水有限公司、哈希水质分析仪器(上海)有限公司、同济大学、天津泰达水业有限公司、上海青浦自来水有限公司、上海市松江自来水有限公司、上海市自来水奉贤有限公司、沈阳水务水质检测技术发展有限公司、衡阳市清源水质检测有限公司、厦门理工学院、厦门市水资源利用与保护重点实验室、昆山市自来水集团有限公司。
 
  本标准中的“微生物”是指具有细胞结构的微生物,如细菌、真菌、藻类和原生动物等。本标准规定了测定水中微生物三磷酸腺苷(ATP)的生物发光法。
 
  本标准适用于以水为基质的样品,包括地表水、水源水、工艺过程水、生活饮用水、直饮水和瓶装水等。
 
  当制备试样的样品体积为50mL 时,方法检出限为0.17pg/mL,测定下限为0.68pg/mL。本标准不适用于溶解性总固体>10000mg/L 的水样,也不适用于含高浓度有机物、重金属等干扰物质的水样。
 
  方法原理:
 
  ATP 是高等植物细胞、高等动物细胞和微生物细胞的主要组成部分,通过测定活性细胞内的 ATP 浓度,可以快速反映水中活性微生物的含量。测定过程中,ATP 和荧光素、荧光素酶等快速反应产生光,经由 ATP 标准物质校准的光度计测定 RLU,根据公式计算最终得到 ATP 浓度。
 
  仪器和设备:
 
  不应将一次性耗材经高压灭菌后重复使用,不应使用含有荧光物质的记号笔。
 
  1.光度计:使用光电倍增管,波长范围至少覆盖530±20nm,测量结果为 RLU。
 
  2.微量移液器:固定式100μL 和1000μL,可调式100~1000μL。
 
  3.高压蒸汽灭菌器:121 ℃可调,用于实验用水等的灭菌。
 
  4.干热灭菌器:160 ℃~180 ℃可调,用于玻璃采样容器和无菌瓶等的灭菌。
 
  5.采样容器:带螺旋盖的无菌瓶或无菌袋,容积>100mL,玻璃、PP和 HDPE 等材质。
 
  6.注射器:容积刻度≥50mL,具活塞,无针头,鲁尔接口,PP 材质,无菌独立包装,一次性使用。
 
  7.测光管:尺寸和光度计(6.1)适配,PP 材质,无菌包装,一次性使用。
 
  8.测光管架:尺寸和测光管(6.7)适配。
 
  9.微量移液器吸头:200 μL 和 1000 μL,与微量移液器(6.2)适配,PP 材质,必须为无菌原盒包装,一次性使用。
 
  10.针头过滤器:滤盘直径≤35 mm,孔径 0.45 μm,鲁尔接口与注射器(6.6)适配,水系混合纤维素酯(MCE)、玻璃纤维等材质,无菌包装,一次性使用。
 
  11.实验室常用仪器、设备和器材。
 
  实验环境:
 
  操作人员应佩戴个人防护用品(7.1~7.3),对实验桌面和仪器进行表面消毒(7.4),减少环境对实验全过程的污染。无菌室不是必须的。
 
  质量保证和质量控制:
 
  1.空白实验
 
  每批(或20个)样品应对1个空白试样(9.4)进行全程序空白实验,测定结果应<方法检出限。
 
  2.单点校准
 
  完成当日所有试样测定后,宜进行一次单点校准,评估当日测定数据的有效性。
 
  详情请见附件。

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