《水中微生物含量的测定 三磷酸腺苷（ATP）生物发光法》团体标准征求意见
- 2024/2/12 8:48:39 25468
- 来源：仪表网
为贯彻《关于加强城市供水安全保障工作的通知》(建办城〔2022〕41 号)，提高供水突发污染应对能力，加强水厂精细化管理，保障供水生物安全，规范水中微生物三磷酸腺苷(ATP)的测定，为《上海市城市总体规划(2017-2035 年)报告》中“全市供水水质达到国际先进标准，满足直饮需求”提供技术支撑，编制组经广泛调查研究，并在充分征求意见的基础上，制定本标准。
本标准参照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。
本标准起草单位：上海浦东水务(集团)有限公司、东方国际集团上海环境科技有限公司、上海南汇自来水有限公司、哈希水质分析仪器(上海)有限公司、同济大学、天津泰达水业有限公司、上海青浦自来水有限公司、上海市松江自来水有限公司、上海市自来水奉贤有限公司、沈阳水务水质检测技术发展有限公司、衡阳市清源水质检测有限公司、厦门理工学院、厦门市水资源利用与保护重点实验室、昆山市自来水集团有限公司。
本标准中的“微生物”是指具有细胞结构的微生物，如细菌、真菌、藻类和原生动物等。本标准规定了测定水中微生物三磷酸腺苷(ATP)的生物发光法。
本标准适用于以水为基质的样品，包括地表水、水源水、工艺过程水、生活饮用水、直饮水和瓶装水等。
当制备试样的样品体积为50mL 时，方法检出限为0.17pg/mL，测定下限为0.68pg/mL。本标准不适用于溶解性总固体>10000mg/L 的水样，也不适用于含高浓度有机物、重金属等干扰物质的水样。
方法原理：
ATP 是高等植物细胞、高等动物细胞和微生物细胞的主要组成部分，通过测定活性细胞内的 ATP 浓度，可以快速反映水中活性微生物的含量。测定过程中，ATP 和荧光素、荧光素酶等快速反应产生光，经由 ATP 标准物质校准的光度计测定 RLU，根据公式计算最终得到 ATP 浓度。
仪器和设备：
不应将一次性耗材经高压灭菌后重复使用，不应使用含有荧光物质的记号笔。
1.光度计：使用光电倍增管，波长范围至少覆盖530±20nm，测量结果为 RLU。
2.微量移液器：固定式100μL 和1000μL，可调式100～1000μL。
3.高压蒸汽灭菌器：121 ℃可调，用于实验用水等的灭菌。
4.干热灭菌器：160 ℃～180 ℃可调，用于玻璃采样容器和无菌瓶等的灭菌。
5.采样容器：带螺旋盖的无菌瓶或无菌袋，容积>100mL，玻璃、PP和 HDPE 等材质。
6.注射器：容积刻度≥50mL，具活塞，无针头，鲁尔接口，PP 材质，无菌独立包装，一次性使用。
7.测光管：尺寸和光度计(6.1)适配，PP 材质，无菌包装，一次性使用。
8.测光管架：尺寸和测光管(6.7)适配。
9.微量移液器吸头：200 μL 和 1000 μL，与微量移液器(6.2)适配，PP 材质，必须为无菌原盒包装，一次性使用。
10.针头过滤器：滤盘直径≤35 mm，孔径 0.45 μm，鲁尔接口与注射器(6.6)适配，水系混合纤维素酯(MCE)、玻璃纤维等材质，无菌包装，一次性使用。
11.实验室常用仪器、设备和器材。
实验环境：
操作人员应佩戴个人防护用品(7.1～7.3)，对实验桌面和仪器进行表面消毒(7.4)，减少环境对实验全过程的污染。无菌室不是必须的。
质量保证和质量控制：
1.空白实验
每批(或20个)样品应对1个空白试样(9.4)进行全程序空白实验，测定结果应<方法检出限。
2.单点校准
完成当日所有试样测定后，宜进行一次单点校准，评估当日测定数据的有效性。
详情请见附件。
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