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《粮油检验 谷物中淀粉含量的测定 分光光度法》征求意见

2023/5/22 10:44:48    29218
来源:仪表网
摘要:本文件规定了谷物中淀粉含量的检测方法。本文件适用于谷物中淀粉含量的检测。
  【仪表网 行业标准】由国家粮食和物资储备局组织起草的《粮油检验 谷物中淀粉含量的测定 分光光度法》标准已形成征求意见稿,现向社会公开征求意见,截止日期为2023年7月19日。意见反馈邮箱:tc270sc1@ags.ac.cn。
 
  谷物胚乳中最主要的碳水化合物为淀粉,质量分数在70%~80%。淀粉不仅是人类主要的食物来源,也是应用广泛的工业原材料。淀粉工业已成为重要的工业,淀粉及其制品的应用越来越广泛,其产品几乎应用于各个领域,对工业和人们的日常生活产生着重要影响,且淀粉在诸多领域有着不可替代的作用和应用价值。
 
  总淀粉含量的测定方法分为间接测定法和直接测定法两种。其中,将测定时不需要对样品中的淀粉进行水解,转化为还原糖的方法称为直接测定法;将测定时需要对样品中的淀粉进行水解转化成还原糖,然后测定还原糖的含量,最后用还原糖的量计算淀粉含量的方法定义为间接测定法。间接法一般分为两个步骤,一是样品中淀粉的水解,二是还原糖的测定。迄今为止,淀粉的水解方法有酶解法和酸解法两种。国标法 GB 5009.9-2016《食品安全国家标准 食品中淀粉的测定》中第一法酶解法和第二法酸水解法测定总淀粉含量结果准确,但操作步骤繁琐,使用试剂种类多,测定时间长,分析速度慢,对操作要求比较严格。需要测试人员具备良好的试验技能,适合对测定结果要求较高且测定的样品数量较少的试验使用。与此同时,食品行业日常生产质控、第三方检测机构为社会提供食品检验技术服务,均需要更加操作简便、经济高效、结果准确、适用性广的检测方法,现有标准方法尚不能完全满足。
 
  本标准在酶解法的基础上,为改善酶解法和水解法测定过程中一系列影响检测技术性能的问题,针对现有的淀粉总量测定方法进行研究,规范检测方法标准,提高检测效率和检测结果准确性,旨在建立科学规范的快速检测定量方法,进一步准确评价谷物中淀粉含量的准确性,鼓励粮食的生产和推广,加强政府监管能力,保障人民群众的身体健康。
 
  本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件规定了谷物中淀粉含量的检测方法。本文件适用于谷物中淀粉含量的检测。
 
  原理:
 
  耐热α-淀粉酶将淀粉水解为可溶性直链和支链麦芽糊精,淀粉葡萄糖苷酶将麦芽糊精水解成D-葡萄糖,D-葡萄糖被氧化为D-葡萄糖酸脂,释放出H2O2,再用过氧化氢酶催化进行显色反应,产生的醌亚胺染料用比色法测定。
 
  仪器和设备:
 
  1.分析天平:感量 0.01g、0.001g、0.0001g。
 
  2.旋风磨:样品粉碎后可通过40目筛网。
 
  3.紫外可见分光光度计:配1cm 比色皿。
 
  4.恒温水浴锅:100 ℃±2 ℃、50 ℃±1 ℃。
 
  5.涡旋混合器。
 
  6.pH 计:精度±0.01。
 
  7.离心机:转速不低于3000 r/min。
 
  8.干燥箱。
 
  9.移液器:量程10uL~100uL、20uL~200uL、1000uL~5000uL、1000uL~10000uL,配备一次性吸头。
 
  10.离心管:15mL、50mL 聚丙烯离心管。
 
  试样处理:
 
  准确称取待测样品100 mg±5 mg(准确至0.001 g),置于15 mL聚丙烯离心管底部。向待测离心管中加入5.0 mL 80%乙醇溶液,在80 ℃~85 ℃下水浴保持5 min,混匀;再次加入5.0 mL 80%乙醇溶液,3000 r/min离心10 min,弃去上清液;加入10.0 mL 80%乙醇溶液,混匀,3000 r/min离心10 min,弃去上清液。向离心管中加入0.2 mL 80%乙醇溶液,涡旋混合均匀。加入3 mL耐热α-淀粉酶,沸水浴中保持12 min,每隔4 min振荡一次。加入100 uL淀粉葡萄糖苷酶,涡旋混合均匀,50 ℃下水浴保持30 min。
 
  将离心管中的样品全部转移至100 mL容量瓶,用蒸馏水冲洗离心管2次~3次并转入容量瓶中,蒸馏水定容至100 mL,混匀,转入50 mL离心管中,3000 r/min离心10 min,取上清液,备用。
 
  测定:
 
  准确移取7.4试样离心后的上清液0.1 mL、葡萄糖标准溶液0.1 mL和水0.1 mL(试剂空白)置于三个15 mL聚丙烯离心管中,分别加入3.0 mL葡萄糖氧化酶-过氧化物酶-缓冲液混合物,50 ℃下水浴反应20 min;取出离心管,冷却至室温。
 
  用分光光度计于波长510 nm处分别测定样品溶液(𝐴𝑋)、葡萄糖标准工作溶液(𝐴1)和试剂空白溶液(𝐴0)的吸光度值。
 
  精密度:
 
  在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。
 
  其他:
 
  本方法定量限为3.0g/100g。
 
  更多详情请见附件。

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