DM3832/96 微量核酸提取试剂盒（毛发/指甲）

Step1、材料准备和前处理【指甲】1.将指甲(趾甲)剪成1x1 mm左右的小片段(样本量≤50 mg)，全部转移至1.5 mL离心管（自备）中，加入300 μL裂解液1和20 μL蛋白酶K，浸没样本，充分涡旋混匀或摇晃混匀。2.将离心管置于65℃，震荡（900~1,200 rpm）孵育2 h。3.待2 h消化完毕后，12,000 rpm离心3 min，使管盖以及管壁上的液体离心至管底，待用。【毛发】1.取 1~3 根毛发剪成2 mm左右的小片段，全部转移至1.5mL离心管（自备）中，加入300 μL裂解液1和20 μL蛋白酶K，浸没样本，充分涡旋混匀或摇晃混匀。2.将离心管置于65℃，震荡（900~1,200 rpm）孵育2 h。3.待2 h消化完毕后，12,000 rpm 离心3 min，使管盖以及管壁上的液体离心至管底，待用。Step2、核酸提取1.从消化完毕后，离心后的1.5 mL离心管中吸取所有上清液至新的离心管中，加入20 μL磁珠悬浮液和600 μL的结合液2，颠倒混匀5 min。2.将离心管放置于磁力架上静置30 sec，磁珠吸附后，小心吸去液体。3.将离心管从磁力架上取下，加入500 μL洗涤液3，振荡混匀2 min。4.将离心管放置于磁力架上静置30 sec，磁珠吸附后，小心吸去液体。5.将离心管从磁力架上取下，加入500 μL洗涤液4，振荡混匀2 min。6.将离心管放置于磁力架上静置30 sec，磁珠吸附后，小心吸去液体。7.将离心管从磁力架上取下，加入500 μL洗涤液5，振荡混匀2 min。8.将离心管放置于磁力架上静置30 s，磁珠吸附后，小心吸去液体。9.重复步骤7和8一次。10.将离心管于磁力架上，室温晾干2~3 min。注意：乙醇残留会抑制后续的酶反应，所以晾干时要确保乙醇挥发干净。但也不要干燥太长时间，以免难以洗脱DNA。11.将离心管从磁力架上取下，加入50~100 μL洗脱液6，振荡混匀，置于65℃，震荡（900~1,200 rpm）孵育15 min。12.将离心管放置于磁力架上静置2 min，磁珠吸附后，小心将DNA溶液转移至一个新离心管中，并于适当条件保存。