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Axion CytoSMART Lux3箱内全自动活细胞成像系统(原Lonza CytoSMART活细胞成像仪),为荷兰进口细胞成像仪,体积小巧,可方便地用于二氧化碳培养箱内,在明场、荧光通道下对细胞培养进行监测,并通过拍摄高品质细胞图像、延时摄影、快速可靠的数据处理软件,实现对样本形态及行为变化的实时可视化分析。
CytoSMART Lux3细胞成像仪优势
1、体积小巧
所有硬件和电子器件都能在5~40°C及20~95%的湿度环境下运行。更小尺寸,重量1.3kg,箱内移动无压力,空间占用少。
2、操作简单
step-by-step引导式实验流程设定,点击即自动呈现数据、图片或影像,照片上传国内云端服务器,进行图像数据分析。即插即用,无需安装调试,无易损模块,无需维护。
3、高品质图片
LED光源位于样本上方,数据采集由样本台下方的可变焦镜头完成,640万像素CMOS成像,10倍镜下0.7μm/像素的超高分辨率,只使用CMOS 67%的核心区域成像,避免畸变困扰。
4、方便拓展
可多台并联,提升实验通量和平台共享能力。一拖四,单台终端即能实现实验室集约管理。
5、兼容各类细胞培养容器
可使用任何高度小于55mm(样本台到光源下沿的距离)的透明培养容器,如6~384孔多孔培养板、培养皿、T25~T225培养瓶等。
CytoSMART Lux3细胞成像仪应用
支持明场、以及红色和绿色荧光双通道细胞计数,可对样本中被荧光标记细胞的数量和大小进行定量计算,并开展长期追踪。
1、转染与转导
CytoSMART Lux3优秀的成像能力和机器学习算法,可对荧光报告基因载体的表达进行直接观测和定量测定。
实验样本为HepG2细胞,使用了BacMam表达系统进行转导。通过图像数据自动分析,软件给出了细胞覆盖度和荧光标记计数的实时结果。蓝色对应整体样本,绿色和红色对应其中表达了BacMam-Actin-GFP及/或BacMam-Nucleus-RFP的那部分细胞。可以看到从转染后第7小时开始,红色和绿色荧光蛋白的表达一直呈现迅速升高的趋势,且过夜以后仍然未见衰退,虽然此时细胞的增殖已经进入平台期。而且转导表达会先发生在细胞骨架中,那里表达的蛋白量也高于细胞核。这些数据结合影像,提供了综合性的转导质控依据。
2、细胞汇合变化
支持在2D培养体系中计算被细胞覆盖的表面占比,提供高效、保真的细胞汇合度分析。基于图像的自动捕获及计算,自动生成报告展示细胞覆盖度(%,成像范围内总的细胞覆盖度,当使用荧光成像时,分别给出红色及绿色荧光的覆盖度)、汇合比例(%,发出绿色及红色荧光物体各自的覆盖度)数据。应用于在无标记或荧光标记实验中计算细胞汇合度、确定合适的细胞传代时间点以维持细胞表型及培养质量、药物处理后细胞汇合度及活力评估、设定提醒内容告知何时完成细胞传代等。CytoSMART Lux3自动对细胞活力和增殖过程进行追踪并给出定量分析,提高实验的效率和可重复性。
3、划痕/迁移跟踪
支持观察划痕实验,可在实验全程中无标记地检测细胞的迁移,实时观察并定量检测伤口闭合或者是细胞侵袭的过程,以评估药物处理及条件改变对于迁移过程中细胞的影响等。系统可自动选定无细胞区域(即划痕),并定量计算该缺口闭合及细胞迁移的速度,提供划痕面积(μm2,变化中的划痕面积)、速度(μm2/s,细胞迁移速度)等数据。
4、细胞凋亡
结合特定凋亡通路的荧光标记,Lux3可以在监控样本动态变化的过程中,提示凋亡事件发生的时间顺序或通路依赖性。
绿色荧光染料pSIVA-IANBD能结合外翻的细胞膜中磷脂酰(PS),从而提示早期的凋亡发生;而PI则是常用的细胞核红色荧光染料,它能指示凋亡过程的终结。在两组CHOK-1细胞样本中加入上述两种荧光染料后,并联使用两台Lux3,进行了间隔为10分钟的连续摄像并一直持续到第24小时。图中的上层为空白对照组的延时成像结果,下层为同时间点经0.6mM H2O2处理发生了细胞凋亡的实验组的成像结果。通过对荧光区域的定量识别,CytoSMART云端计算能分析得到并自动生成两个样本各自的凋亡指数曲线,为凋亡研究提供重要的判断依据。
5、单细胞示踪
在ibidi μ-Slide channel板中观察细胞对FBS的浓度变化是否做出趋向性运动。HeLa细胞上样时培养基中FBS的浓度为10%。在相邻的两个Channel中则分别添加20%和0% FBS浓度的同种培养基,在这样的FBS浓度梯度环境中,细胞是可以移动的。另设一块趋化板作为对照组,其中不同部位的FBS浓度均为10%。该实验并联使用了两台Lux 3,以每5分钟拍摄一次的频率连续采样24小时。随后以图片为原始数据,使用CytoSMART单细胞识别功能及第三方软件的追踪功能,来对每个细胞的运动轨迹进行统计学分析。结果发现,HeLa细胞在FBS浓度恒定的环境中会在更大范围内做均匀分散;而在具有FBS浓度差的环境中,其运动范围则更为集中,而且存在向更高浓度区域运动的倾向。
型号 | Lux3 BR | Lux3 FL |
名称 | 箱内明场活细胞成像仪 | 箱内荧光/明场活细胞成像仪 |
放大倍数 | 10×物镜,20×数放大 | |
感光元件 | 6.4 MP CMOS | |
照片大小 | 2072像素*2072像素 | |
明场扫描范围 | 1.45mm*1.45mm | |
光学通道 | 明场 | 明场,红色/绿色荧光 |
数据格式 | JPG、TIFF、XLSX、MP4 | |
培养容器尺寸 | 任何高度小于55mm的透明底培养容器 | |
主机尺寸 | 166mm*140mm*135mm (L*W*H) | |
重量 | 1.3kg | |
运行环境 | 5~40℃,20-95%湿度 |
参考文献
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