通过一系列对比实验发现,使用 BlotCyclerTM 全自动蛋白质印迹杂交系统 进行Western Blot实验 可以获得更低的背景值,目的蛋白质条带更加清晰锐利。
如上图所示,泳道1、2、3 分别上样Hela 细胞的裂解液、重组的人IL-2 蛋白和前两者的混合物,加入小鼠源Tubulin和兔源IL-2 的一抗,以及DyLight549 标记的抗鼠二抗和DyLight649 标记的抗兔二抗。 设立4 组平行实验:BlotCyclerTM 全自动蛋白质印迹杂交系统 4℃环境操作,手工4℃环境操作, BlotCyclerTM 全自动蛋白质印迹杂交系统 室温环境操作,手工室温环境操作, 膜信号检测使用相应的荧光成像设备。不同组内蛋白条带的信号通过分子量标准品进行均一化处理。 结果发现,使用 BlotCyclerTM 全自动蛋白质印迹杂交系统 操作所获得的IL-2 和Tubulin 的相对信号值均高于手工操作,不论是4℃还是室温环境。由此可见, BlotCyclerTM 全自动蛋白质印迹杂交系统 的自动化操作确实能够降低背景值,提高信噪比和相对灵敏度。