初级会员第 7 年经销商
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公司所有产品均不得用于人类或动物之临床诊断或治疗,仅可用于工业或科研等非医疗目的。
产品名称 | A673人横纹肌瘤细胞 | 货号 | A01X650 |
规格 | 1×10⁶cells/T25培养瓶 | 英文名 | A673:A673 |
分类 | 人细胞系 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
商品介绍:
别称 | A673 |
种属 | 人类 |
年龄(性别) | 女性,15岁 |
组织来源 | 肌肉;横纹肌肉瘤 |
生长特性 | 贴壁细胞 |
细胞形态 | 多边形 |
详情简介 | A-673细胞是一株源自15岁女性的横纹肌肉瘤的细胞株。A-673细胞在软琼脂上可形成克隆,亦能在免疫抑制血清处理的小鼠中成瘤。A-673细胞有四个以上的标志染色体,一个额外的F染色体和两个异常的B染色体。 |
生物安全等级 | 1 |
生长培养基 | DMEM+10% FBS+1% P/S |
推荐传代比例 | 1:3-1:4 |
推荐换液频率 | 2~3次/周 |
倍增时间 | ~28小时 |
冻存条件 | |
冻存液 | 55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO |
温度 | 液氮 |
培养条件 | |
气相 | 空气,95%;CO2,5% |
温度 | 37℃ |
细胞冻存注意事项:
(1) 细胞的收获
用来冻存的细胞一般选择在细胞约铺满 90% 的时候,这时细胞生长状态好,细胞数量也多,并且在收获细胞前 24 小时换一次培养液。收获用来冻存的细胞开始时方法和平时一样,用 100xg 离心 5 分钟收集细胞再重悬,活细胞记数。稀释或浓缩到细胞保存的最终细胞浓度的二倍(一般是 400-1000 万 细胞 /ml ),加入已经配好的等体积的培养液保护剂混合溶液中轻轻混匀,分装到冻存管,冷冻保存。
(2) 保护剂的使用
细胞冻存中, 一般使用DMSO 作为保护剂。在细胞冻存中, DMSO 使用的最终浓度一般是 5-15% ,某种具体细胞的冻存液中的DMSO浓度可以从ATCC查到。对特别敏感的细胞特别是杂交瘤细胞在冻存时使用 95% 血清和 5%DMSO 可能会好些。保护剂在使用时先用培养液或血清配成最终浓度的2倍,再与等体积的悬浮细胞的培养液混合。
(3) 细胞冻存的速率
细胞的冷冻速率最适控制在让细胞有足够的时间脱水而又不被过度脱水导致细胞损害。对大多数细胞来说,每分钟降 1 至 3 ℃是合适的。通常的操作是把细胞先在-20℃1-2个小时,再放入 -80℃冰箱过夜(如果没有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再转入液氮罐或低于 -130℃的冰箱长期保存。
(4) 储存环境
细胞长期保存温度是 -130 ℃或更低。液氮罐中气态层温度在 -140℃至 -180℃之间,细胞可保存在气态层或浸入液氮中,如果可能最好保存在气态层,因为这样可避免由于有液氮进入冻存管而在拿出细胞时引起爆炸(但是这样液氮罐内只能存储少量液氮,需要经常添加)。细胞也可以在-80℃冰箱保存几个月左右的时间。
操作步骤:
(1) 细胞系培养:取6cm细胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105个细胞培养液,37℃ CO2培养密度至40%~60%,密度过大,转染后不利筛选细胞。
(2) 转染液制备:在EP管中制备以下两液(为转染每一个孔细胞所用的量)
A液:用不含血清培养基稀释1ug 质粒DNA。
B液:用不含血清培养基稀释2ul脂质体。
分别将A液与B液轻弹混匀,静置5分钟。
(3) 吸取B液加入至A液中,轻弹混匀。室温中置10-15分钟。
(4) 转染准备:用1mL不含血清培养液漂洗两次,再加入4mL不含血清培养液。
(5) 转染:把A/B复合物缓缓加入培养液中,摇匀,37℃温箱置6~24小时,吸除无血清转染液,换入正常培养液继续培养。
(6) 瞬时转染后,可在48h-72h细胞长满之后,提取细胞蛋白或者RNA,验证敲减/过表达效率。
公司正在出售的产品:
CD98重链抗原抗体 磷酸化表皮生长因子受体重组兔单克隆抗体 英文名;phospho-EGFR (Ser695)
CHIC2蛋白抗体 磷酸化蛋白激酶AKT1抗体 英文名;phospho-AKT1 (Tyr474)
CRB1蛋白抗体 磷酸化蛋白激酶底物相关蛋白抗体 英文名;phospho-HEF1 (Ser369)
Cullin3抗体 磷酸化钙调节蛋白-1抗体 英文名;Phospho-Cardiac Troponin I (Ser23 + Ser24)
C型凝集素4家族E抗体 磷酸化核糖体蛋白S6激酶家族RSK3抗体 英文名;Phospho-RSK3 (Thr353 + Thr356)
DEF8蛋白抗体 磷酸化肌球蛋白轻链多肽4抗体 英文名;phospho-MYL12B (Ser20)
DHX58蛋白抗体 磷酸化紧密连接蛋白6抗体 英文名;phospho-Claudin 6 (Tyr219)
DNAJB12蛋白抗体 磷酸化酶β抗体 英文名;PHKB
APC-Cy5.5标记小鼠CD19单克隆抗体 卷曲螺旋结构域蛋白90A抗体 英文名;CCDC90A
APC-Cy7标记小鼠CD11b单克隆抗体 抗利尿激素1A抗体 英文名;AVPR1A
APC标记人CD16单克隆抗体 可溶性载质转运蛋白2B1抗体 英文名;SLCO2B1
APC标记人CD58单克隆抗体 跨膜蛋白111抗体 英文名;TMEM111
APC标记小鼠CD274单克隆抗体 跨膜蛋白59抗体 英文名;TMEM59
A-Raf抗体 跨膜蛋白Smoothened抗体 英文名;SMO
ATP结合盒转运家族蛋白9抗体 快速周期调节蛋白SPDYE1抗体 英文名;SPDYE1
ATP依赖的干扰素反应蛋白1抗体 赖氨酰氧化酶样3抗体 英文名;LOXL3
A型流感病毒H1N1-M2蛋白抗体 类固醇5α还原酶2抗体 英文名;SRD5A2
BCL10结合蛋白和激活核转录因子抗体 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子3单克隆抗体 英文名;G-CSF
6号染色体开放阅读框222抗体 甲基化样蛋白2A抗体 英文名;METTL2A
7号染色体开放阅读框30抗体 甲羟戊酸脱羧酶抗体 英文名;MVD