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T25m2 人脐动脉内皮细胞提取物说明

具体成交价以合同协议为准

2021-06-21上海市
型号
T25m2
上海莼试生物技术有限公司

初级会员8经销商

该企业相似产品
PCR检测试剂盒、PCR试剂盒, 核酸检测试剂盒,荧光定量检测试剂盒,生化试剂盒 ,比色法试剂盒,酶活性检测试剂盒,ELISA试剂盒,酶联免疫检测试剂盒,试剂盒,ELISA试剂盒,抗体,重组蛋白,分光光度法检测试剂盒,细胞株,原代细胞,细胞培养基,标准溶液产品。代理并销售进口SIGMA试剂、abcam抗体、R&D抗体、CST抗体、ATCC细胞、BD公司、GE公司公司产品。
产品简介
人脐动脉内皮细胞提取物说明收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
详细信息

收到冻存细胞的处理方法:
1.37°C水浴预热培养基;
2.从液氮中取出细胞迅速放入37°C水浴快速解冻(解冻后不要继续暖细胞);
3.在超净台中加入5ml培养基重悬细胞,1000rpm离心5min
4.弃上清,加入5ml培养基重悬细胞后转入T25培养瓶中,轻轻晃匀;
5.置于37°C5% CO2培养箱中培养(培养瓶盖没有透气孔的话,瓶盖不要拧太紧)
6.第二天,用新鲜的培养基给细胞换液后继续培养。

人脐动脉内皮细胞提取物【Human Aortic: Normal Aortic Smooth Muscle Cell Derivatives】人脐动脉内皮细胞提取物是从人原代脐动脉内皮细胞提取的,人原代脐动脉内皮细胞从正常人脐动脉内皮组织制备。正常人脐动脉内皮组织采集自各地方医院,采集工作根据IRB HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

RNA制备:利用Qiagen RNeasy KitTrizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。

cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA第一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mgRNA68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。

蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF-80度保存。

潜在的应用: <1>已知基因的PCR克隆;<2>mRNA选择性剪接;<3>基因克隆与目标测序;<4> Western and Northern Blot<5>蛋白检测与蛋白质组学;<6>芯片研究与表达图谱。该细胞只可用于科研,不得用于临床应用。

产品名称

人脐动脉内皮细胞提取物说明

规格

T25m2

货号

CS-963959

实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2
.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理; 
3
.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4
.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5
.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4放置;
3、剩下的组织再加入34mL酶消化液,混悬10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10 FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37 5CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
2PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4条件下,用0.1Triton X-100透膜15min
3PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4冰箱中孵育细胞过夜;
5PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37条件下放置1h
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
注意事项:
1.接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色
,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,375%CO2培养。
 1173111-67-5  SNX-5422 Mesylate (PF-04929113 (Mesylate))  50mg  Blastocystis spp.芽囊原虫通用探针法荧光定量PCR试剂盒 

1173111-67-5  SNX-5422 Mesylate (PF-04929113 (Mesylate))  5mg  Arthrinium spp.节菱孢霉属通用探针法荧光定量PCR试剂盒 

1173154-32-9  ALB-127158(a)  100mg  Dictyocaulus viviparus牛肺线虫探针法荧光定量PCR试剂盒 

1173154-32-9  ALB-127158(a)  10mg  Alternaria spp.交链孢霉属通用探针法荧光定量PCR试剂盒 

1173154-32-9  ALB-127158(a)  10mM*1mLinDMSO  Alternaria spp.交链孢霉属通用探针法荧光定量PCR试剂盒
AXL Others Human  Axl Kinase 细胞裂解液 (阳性对照) 9-(2-)腺嘌呤9-(2-Hydroxyethyl)adenine质量规格:美国进口

脐动脉平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105(1ml)E-64d,蛋白酶抑制剂,阿洛司他丁E64d,E-64d质量规格:>98%,BR

EFNA1 Others Rat 大鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 细胞裂解液 (阳性对照) 2-脱氧胞苷-5-1酸二钠盐dCMP,2Na质量规格:>98%BR

大鼠输尿管上皮细胞*培养基 100mLdAMP;2-脱氧腺苷-5-12'-Deoxyadenosine 5'-monophosphate质量规格:>99%,BR

OKT 11杂交瘤细胞抗CD2 OKT 11 hybridoma cells against CD2 IMDM培养基(GIBCO)+20%FBS黄素腺嘌呤二核苷酸二钠盐FAD-Na2质量规格:BR,罗氏进分
人脐动脉内皮细胞提取物说明大鼠肝细胞;IAR20胆乙基碳酸酯(>94.0%(GC))质量规格:>94.0%(GC)Cholesterol Ethyl Carbonate

ACVR1 Others Mouse 小鼠 ALK-2 / ACVR1 细胞裂解液 (阳性对照) 胆异丙基碳酸酯(>95.0%(GC))质量规格:>95.0%(GC)Cholesterol Isopropyl Carbonate

小胶质细胞培养基MM-prf胆丁基碳酸酯质量规格:Cholesterol Butyl Carbonate

HA Others H9N2 甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 细胞裂解液 (阳性对照) 胆异丁基碳酸酯质量规格:Cholesterol Isobutyl Carbonate

大鼠肺大动脉平滑肌细胞*培养基 100mL单硝酸异山梨酯质量规格:含量测定Isosorbide 5-mononitrate

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