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眼脉络黑色素瘤细胞:C918

具体成交价以合同协议为准

2022-05-06上海市
型号
参数
品牌:其他品牌 货号:GOY-01X0262
上海谷研实业有限公司

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产品简介
眼脉络黑色素瘤细胞:C918 公司正在出售的产品:马铃薯浸出粉 250g1瓶 SV-HUC-1细胞株 SV-HUC-1 低温运输和保存尿素琼脂基础 Urease Agar Base 250g100g 乙二胺四乙酸 (EDTA) EDTA 室温保存50T 鹅细小病毒PCR检测试剂盒 低温运输,-20℃保存
详细信息

公司细胞现货供应,质量有保证、*、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供最新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。

产品名称

眼脉络黑色素瘤细胞:C918 

规格

1×10⁶cells/T25培养瓶

分类

细胞系

货号

GOY-01X0262

商品介绍:

名称 眼脉络黑色素瘤细胞:C918 

种属人类

年龄(性别)不详

组织来源未知

生长特性贴壁细胞

细胞形态多角形

背景描述STR检测发现,三株人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞C918M619Mum-2B为同一遗传背景,怀疑存在交叉污染。

生长培养基RPMI-164010% FBS1% P/S

推荐传代比例1:2-1:4

推荐换液频率2~3/

冻存条件

冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度:液氮

培养条件

气相:空气,95%CO25%

温度:37℃

使用方法:

收到细胞后,请按照以下方法进行操作。

1. 取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。

2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。

3. 细胞传代

1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;

2) 添加0.125%消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入*培养液终止消化;

3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的*培养基至5mL,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养;

4) 待细胞*贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的*培养基。

 

培养操作:

1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;

1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。

2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。

3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
图片13.jpg

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。

2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

二.细胞处理:

1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

glypican 4 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签

bFGF 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签

CD309 / VEGFR2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签

小鼠 TGF-beta2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签

CHRFAM7A 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签

NAMPT 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签

GOLM1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签

小鼠 SCAR

眼脉络黑色素瘤细胞:C918 2 ug pGADT7Rec pGADT7Rec 低温运输,-20℃保存

Baird-Parker琼脂基础 Baird-Parker Agar Base 250g

5g 戊钠 Pentobarbital Sodium Salt  室温保存

50T 空肠弯曲菌PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

抗生素检定培养基6号(PH7.2-7.4)  500g

100mg 溴化乙锭 (EB) EB(Ethidium Bromide)   室温避光保存

500mL Krebs-Ringer Solution [Bicarbonate Buffered]  Krebs-Ringer Solution [Bicarbonate Buffered]  常温保存

300U 无RNase的DNase溶液,1U/μL RNase-Free DNase Solution -20℃保存

1瓶 HFF细胞株 HFF 低温运输和保存

API2  凋亡抑制因子2抗体 规格: 0.2mlGRIM19  干扰素/维甲酸诱导凋亡相关基因抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350标记的兔抗羊IgG 规格: 0.1ml

PEDF/SERPINF1  色素上皮源性因子抗体 规格: 0.1ml

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产品参数

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货号 GOY-01X0262
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