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小鼠肝实质细胞

具体成交价以合同协议为准

2022-05-16上海市
型号
参数
品牌:其他品牌 货号:GOY-01X0814
上海谷研实业有限公司

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产品简介
小鼠肝实质细胞公司正在出售的产品:100mL 电泳级甘油 Glycerol,EG 常温2 ug pGZ pGZ 低温运输,-20℃保存琼脂培养基K(XLD琼脂) Agar Medium K(Xylose,Lysine,Dexycholate Agar) 250g1瓶 HPAC细胞株 HPAC 低温运输和保存瓷珠菌种保存管(20支) Strain Store Medium 20支/盒
详细信息

公司细胞现货供应,质量有保证、*、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供最新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。

产品名称

小鼠肝实质细胞

规格

5×10⁵Cells/T25培养瓶

分类

原代细胞

货号

GOY-01X0814

商品介绍:

名称 小鼠肝实质细胞

2.组织来源:肝脏组织

3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介:

小鼠肝实质细胞分离自肝脏组织;肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官,并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用;肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里最大的器官,位于机体中的腹部位置,在右侧横隔膜之下,位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方,胃的上方。肝脏是机体消化系统中最大的消化腺,为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官,又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构:肝脏位于右上腹,隐藏在右侧膈下和肋骨深面,大部分肝为肋弓所复盖,仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁,肝上面则与膈及腹前壁相接。肝实质细胞是指具有肝功能的单位,是肝脏的基本组成单位之一。肝实质细胞与主要病生理变化:急性肝炎、肝硬化、肝脓肿。肝实质细胞属于中高度分化细胞,生长营养需求高,在体外存活时间短;细胞呈圆形或多角形,核大而圆,居中,常染色质丰富,部分有双核或多倍体核。肝脏作为体内重要的器官,在整个物质代谢过程中具有广泛而多样的作用。

5.方法简介:

()实验室分离的小鼠肝实质细胞采用混合酶灌流消化、反复低速离心制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测:

()实验室分离的小鼠肝实质细胞Cytokeratin-18免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

包被条件鼠尾胶原2-5μg/cm2

培养基含FBS、生长添加剂、PenicillinStreptomycin

产品货号CM-M033

换液频率每2-3天换液一次

生长特性贴壁

细胞形态上皮细胞样

传代特性可传1-2

消化液0.25%

培养条件气相:空气,95%CO25%

使用方法:

收到细胞后,请按照以下方法进行操作。

1. 取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。

2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。

3. 细胞传代

1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;

2) 添加0.125%消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入*培养液终止消化;

3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的*培养基至5mL,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养;

4) 待细胞*贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的*培养基。

 

培养操作:

1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;

1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。

2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。

3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
图片13.jpg

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。

2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

二.细胞处理:

1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

25mL Agarose Gel Loading Buffer-Sucrose (蔗糖型上样液),6X    Agarose Gel Loading Buffer-Sucrose ,6X    常温保存 62.5-4000 pg/mL 人层粘连蛋白γ2(LAMγ2)ELISA试剂盒

10mL DNA上样液 (蓝色),6×(非甘油) DNAON  4℃保存 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Utrophin

2 ug pGEX-2T pGEX-2T 低温运输,-20℃保存

小鼠肝实质细胞2 ug pYCPlac33 pYCPlac33 低温运输,-20℃保存

m-TGE肉汤 m-TGE Broth 250g

2 ug pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP 低温运输,-20℃保存

500mL PIPES Buffered Saline,5X,pH6.5  PIPES Buffered Saline,5X,pH6.5  常温保存

100次 一步法质粒 DNAout 2.0 One-Step Plasmid DNAOUT 2.0 常温保存(溶液A需4℃保存)

1瓶 NCI-H522细胞株 NCI-H522 低温运输和保存

100g RNSarkosyl (月桂酰-N-甲基氨基乙酸钠)   常温

1瓶 GBC-SD细胞株 GBC-SD 低温运输和保存

氯、碘中和剂管  9ml*20

50次 T3体外转录试剂盒 T3 in vitro Transcription Kit -20℃保存

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