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具体成交价以合同协议为准
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公司产品仅用于科研
产品名称:非洲绿猴肾细胞
产品英文代号:VERO E6
细胞培养条件:MEM+10%FBS+1%P/S
生长状态:贴壁生长
产品规格:1×106
单位:T25/瓶
是否提供细胞STR鉴定:不提供STR鉴定报告
保存培养温度(℃):37
运输温度(℃):常温
运费基数:活细胞包邮/冻存100-400元干冰费
稳定货期(是or否): 是
产品名称 | |
规格 | 1×106 |
货号 | BJX6714 |
细胞培养及传代:
<1>细胞培养
产品仅用于科研细胞请于细胞培养箱中培养,大部分细胞是37℃,5% CO2,湿度环境下培养的。有极少部分细胞培养条件不行,请仔细阅读相应的细胞说明书,使用正确的培养基及培养条件;
细胞于培养瓶或皿中培养,加入适量说明书上标注的细胞相应*培养基(一般液面高度2-3mm即可)。
<2>细胞传代(以下步骤适用于10cm皿)
细胞培养至密度达80%以上时即可传代,先将细胞培养基取出3mL用15mL离心管装好,其他培养基全部吸干舍弃;
培养皿加入2-3mL无菌PBS,轻轻晃动皿,使PBS浸洗到皿底所有部位,PBS吸干舍弃;
加入1mL胰酶,轻轻晃动皿,使胰酶浸没到皿底所有部位,将皿盖好放入培养箱中消化;
3min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞不再贴壁,即可加入*步收集的培养基混匀;
若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至不贴壁为止;
将细胞悬液均匀分成几份,分别加入不同培养皿中,补加新培养基后放回培养箱培养。
<3>相关问题
部分细胞在传代后时,会有以下现象:细胞内会有黑色小点、细胞间隙有些颗粒物、培养基漂浮一些死细胞或者细胞长的极慢。出现以上现象时,可以咨询本公司技术人员此现象是否正常及相关处理方式,不要频繁换液,大多数细胞1周换液2-3次即可。
细胞碎片较多、背景较脏时,贴壁细胞用PBS漂洗两次、悬浮细胞打散后低速离心(900rpm,3min)能有效改善。
传代比例建议1:2-1:3,长得比较快的细胞可以1:3,比较慢的按1:2传代。传代后,建议不要使用传代前培养所使用的培养基,会有大量细胞碎片甚至导致细胞死亡的风险。
细胞状态不好或者生长极慢的时候,可以通过增加血清浓度调整细胞状态及生长速度。
请不要随意更换培养基,因实验需要,可以逐步驯化。
悬浮传代:混匀细胞,收集细胞悬液900-1000rpm离心3min,弃上清。再加5ml PBS重悬细胞,再离心后,用*培养基重悬接种到新的培养皿。第二次PBS重悬是为了去除碎片,如果平时碎片比较少,传代时可以省略PBS重悬的步骤;如果碎片很多,建议PBS多洗一次。
细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml*培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。明舟生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
复苏细胞步骤: 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
产品仅用于科研在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备
记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广,如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等;
适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象
碘甲腺原氨酸脱碘酶Ⅱ(DIO2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 98% 香菇 500mg
桥粒芯胶粘蛋白2(DSC2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 97% 山绿豆根瘤菌 25ml
间隙连接蛋白β1(GJβ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 97% Algoriphagus 5ml
含V-Set免疫球蛋白域蛋白2(VSIG2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 丰度:99atom %;化学纯度:≥98.5% 深绿色木霉 1g
SPARC样蛋白1(SPARCL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 丰度:10atom%;化学纯度:≥98.5% 浅黄隐球酵母 1g
Misato同源物1(MSTO1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 丰度:10atom%;化学纯度:≥98.5% 微球菌 5g
蛋白酶3(PR3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 98% 化脓性链球菌 1g
轻肽神经丝蛋白(NEFL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 98% 康宁木霉 5g
DNA激活蛋白激酶催化亚基肽(PRKDC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 98% 枝芽胞杆菌 100g
酰基羧酸水解酶(AOAH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 98% 大球盖菇 25g
龙虾肽酶样金属内肽酶(ASTL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 98% 米曲霉 5g
酪蛋白β(CSN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 90% 松口蘑 1g
半胱氨酸丰富分泌蛋白3(CRISP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 90% 巴斯德毕赤酵母 25g
2',5'-寡腺苷酸合成酶2(OAS2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 90% 近平滑假丝酵母 5g
2',5'-寡腺苷酸合成酶3(OAS3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 97% 糙皮侧耳 100g
降钙素原(PCT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 97% 刺孢篮状菌 25g
白介素10受体α(IL10Rα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 97% 美澳型核果褐腐病菌 5g
死亡关联蛋白激酶1(DAPK1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 97% 海境芽孢杆菌 25g
非洲绿猴肾细胞价格人胰腺上皮Human Pancreas : Normal Pancreatic Epithelial Cell Derivatives人胰腺上皮细胞提取物是从人胰腺上皮细胞提取的,人胰腺上皮细胞从正常人胰腺组织制备。正常人胰腺组织采集自各地方医院,采集工作根据IRB 和 HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
人抗抗体(AsAb)ELISA试剂盒BiP (C50B12) Rabbit mAb100 ul
人抗骨骼肌抗体(ASA)ELISA试剂盒Progesterone Receptor B Antibody300 ul
人抗平滑肌抗体(ASMA)ELISA试剂盒Phospho-PERK (Thr980) (16F8) Rabbit mAb100 ul
人抗硬皮病抗体70(SCL70/topoⅠ)ELISA试剂盒Phospho-PERK (Thr980) (16F8) Rabbit mAb100 ul
人抗酿酒酵母抗体(ASCA)ELISA试剂盒 Fatty Acid Synthase (C20G5) Rabbit mAb20 ul
人抗Sa抗体(anti-Sa-Ab)ELISA试剂盒 Fatty Acid Synthase (C20G5) Rabbit mAb300 ul
人抗风疹病毒IgM抗体(anti-RV IgM)ELISA试剂盒Phospho-CrkL (Tyr207) Antibody100 ul
人抗风疹病毒IgG抗体(anti-RV IgG)ELISA试剂盒Phospho-CrkL (Tyr207) Antibody100 ul
操作流程:
1.1主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线。