γ氨基丁酸(GABA)微量法检测试剂盒

γ氨基丁酸(GABA)微量法检测试剂盒

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2022-04-27 09:05:44
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产品简介

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详细介绍

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商品属性:

产品名称

γ氨基丁酸(GABA)微量法检测试剂盒

规格

100管/96样

检测方法

微量法

货号

GOY-01S6520

商品介绍:

测定意义

γ-氨基丁酸(GABA)是一种天然活性成分,广泛分布于动植物体内。γ-氨基丁酸是中枢神经系统中有效的抑制性神经递质,具有降血压、增进脑活力、营养神经细胞、保持神经安定、促进生长激素分泌和保肝利肾等作用,目前在医药和保健食品中已有广泛的应用。

测定原理:

和次氯酸钠与GABA反应,产生蓝绿色产物,在640nm有最大吸光值。

需自备的仪器和用品:

分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg1克瓶装,每瓶140000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50100μl湿润管壁,可抗凝人血35ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔510分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置12小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

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γ氨基丁酸(GABA)微量法检测试剂盒3-二 99%少突胶质髓鞘相关蛋白抗体Crkl  接头蛋白CrkL抗体

N-(3-二氨)烯酰 99%CDC42结合蛋白激α抗体(MRCKα)Crk p38 /CRK  Crk p38抗体

十二  98.0%髓样分化蛋白抗体CRISP3  富含半胱氨分泌蛋白3抗体

十二 CP,95%外周髓脂P0蛋白/P0蛋白抗体Cripto-1(NT)  畸胎瘤衍化生长因子抗体(N端)

十六 90%褪黑素受体1A/松果体素受体1A抗体Cripto-1  畸胎瘤衍化生长因子抗体(C端)

十六 98%肌生成素抗体Cripto 1 monoclonal (CT)  畸胎瘤衍化生长因子单克隆抗体(C端)

C18:80-90% 化髓鞘转录因子1抗体Cripto 1 monoclonal  畸胎瘤衍化生长因子单克隆抗体

十八 90%DNA损伤关键蛋白Mre11抗体CRIPT  突触后蛋白CRIPT抗体

十八 ≥97.0% (GC)化DNA损伤关键蛋白Mre11抗体CRIM1  富含半胱氨运动神经元蛋白1抗体

99%蛋白激MST抗体CRHR2  促皮质释放激素受体2抗体

十八 ≥99.0% (GC)化蛋白激MST抗体CRHR2  促皮质释放激素受体2抗体

1,3-二 98%化肌球蛋白轻链2抗体CRHR1/CRFR1  促皮质释放激素受体1抗体

聚二烯二化铵溶液 Mw <100,000 ,35 wt. % 水溶液,100-200髓鞘转录因子1抗体CRHBP  促皮质激素释放激素结合蛋白抗体

聚二烯二化铵溶液Mw 100,000-200,000 ,20 wt. % 水溶液,6髓样白血病-1抗体CRF/CRH  促皮质激素释放因子抗体

Mw 200,000-350,000 ,20 wt. % 水溶液,250-500 cP (25 °C) 微管相关蛋白2抗体CRF/CRH  促皮质激素释放因子抗体

操作步骤:

实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。

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