吡咯啉5羧酸合成酶(P5CS)微量法

吡咯啉5羧酸合成酶(P5CS)微量法

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2022-04-27 09:07:56
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产品简介

吡咯啉5羧酸合成酶(P5CS)微量法检测试剂盒公司正在出售的产品:26146-27-0 规格: HPLC≥98%;10mg
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详细介绍

28.png

商品属性:

产品名称

吡咯啉5羧酸合成酶(P5CS)微量法检测试剂盒

规格

100管/48样

检测方法

微量法

货号

GOY-01S6526

商品介绍:

测定意义

是植物体内适应逆境胁迫的一种重要的渗透调节物质。高等植物中代谢因其初始底物不同,分为( Glu) 和( Orn) 两条合成途径。吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS, Δ1-pyrroline-5-carboxylate synthetase)是以为前体合成途径的关键酶,对植物适应逆境胁迫起关键作用。

测定原理:

吡咯啉-5-羧酸合成酶催化生成P5C过程中分解ATP生成ADP和无机磷,通过钼酸铵比色法测定单位时间内产生无机磷的量可确定P5CS活性。

需自备的仪器和用品:

可见外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg1克瓶装,每瓶140000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50100μl湿润管壁,可抗凝人血35ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔510分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置12小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

Boc-L-天冬1-苄酯  98%三氯硅烷 99%Anti-Sema6A/FITC  荧光素标记抗Sema6A抗体IgG

Boc-L- 98%乙基苯 Standard for GC,≥99.5%(GC)Anti-Sema7A/CD108/FITC  荧光素标记轴突生长因子CD108抗体IgG

BOC-D-缬 98%乙基苯 99.8%,无水级Anti-sFRP/FITC  荧光素标记抗内膜抗体IgG

BOC-L-羟脯甲酯 98%乙基苯 AR,98.5% Anti-SFRP1/FITC  荧光素标记分泌型卷曲相关蛋白1抗体IgG

BOC-L-苯甘 98%乙苯标准溶液1000ppm,基质:甲Anti-SGC/FITC  荧光素标记可溶性糖蛋白C抗体IgG

BOC-D-天冬酰 98%乙基苯 >99.5%(GC)Anti-SGLT1 /FITC  荧光素标记钠-葡萄糖共转运载体1抗体IgG

BOC-L-苯甘氨 98%乙基苯 分析标准品Anti-SGK1/FITC  荧光素标记糖皮质调节激1抗体IgG

苯甲氧羰酰琥珀酰亚 98%间二甲苯 Standard for GC, ≥99.5% (GC)Anti-Phospho-SGK1 (Ser78)/FITC  荧光素标记化糖皮质调节激1抗体IgG

吡咯啉5羧酸合成酶(P5CS)微量法检测试剂盒Anti-TACR3/NK-3 receptor /FITC  荧光素标记速激肽受体3抗体IgG绵羊组织因子途径抑制因子2(TFPI2)联免疫吸附测定试剂盒

Anti-TAK1/FITC  荧光素标记转化生长因子β活化激1抗体IgG绵羊二氢嘧样2(DPYSL2)联免疫吸附测定试剂盒

Anti-Phospho-TAK1 (Ser412)/FITC   荧光素标记化转化生长因子β活化激1抗体IgG绵羊免疫球蛋白G Fc段低亲和力受体IIIb(FcγR3B)联免疫吸附测定试剂盒

Anti-Phospho-TAK1 (Thr184)/FITC   荧光素标记化转化生长因子β活化激1抗体IgG绵羊免疫球蛋白G Fc段受体II(FcγR II/CD32)联免疫吸附测定试剂盒

Anti-Phospho-TAK1 (Thr187)/FITC  荧光素标记化转化生长因子β活化激1抗体IgG绵羊相关血浆蛋白2(PAPPA2)联免疫吸附测定试剂盒

Anti-Phospho-TAK1 (Thr184/187)/FITC  荧光素标记化转化生长因子β活化激1抗体IgG绵羊山梨脱氢(SDH)联免疫吸附测定试剂盒

Anti-Tanis/SELS /FITC  荧光素标记炎症负调控因子蛋白抗体IgG绵羊唾液结合免疫球蛋白样凝集素10(SIGLEC10)联免疫吸附测定试剂盒

Anti-TANK/FITC  荧光素标记TANK抗体IgG绵羊CXC趋化因子受体1(CXCR1)联免疫吸附测定试剂盒

Anti-Talin/FITC  荧光素标记踝蛋白抗体IgG绵羊血管性血友病因子(VWF)联免疫吸附测定试剂盒

Anti-Phospho-Talin (Ser425)/FITC  荧光素标记化踝蛋白抗体IgG绵羊B活化因子受体(BAFFR)联免疫吸附测定试剂盒  

Anti-Tau protein/FITC  荧光素标记微管相关蛋白抗体IgG绵羊不均一核糖核蛋白U (HNRPU)联免疫吸附测定试剂盒

Anti-Tau protein/FITC  荧光素标记微管相关蛋白抗体IgG绵羊线粒体乙脱氢(ALDM)联免疫吸附测定试剂盒

Anti-P-Tau protein (pThr489)/FITC  荧光素标记化微管相关蛋白抗体IgG绵羊纤维胶凝蛋白1(FCN1)联免疫吸附测定试剂盒

Anti-phospho-Tau protein (Ser396)/FITC  荧光素标记化微管相关蛋白抗体IgG绵羊封闭蛋白1(CLDN1)联免疫吸附测定试剂盒

Anti-phospho-Tau protein (Ser422)/FITC  荧光素标记化微管相关蛋白抗体IgG绵羊纤溶-抗纤溶复合物(PAP)联免疫吸附测定试剂盒

操作步骤:

实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。

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