客户只需提供样品和待检测基因名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

产品名称：N-FMOC-尸胺

规格：5 g/25 g

货号：BJP1265

分类：荧光核酸试剂

产品仅用于科研储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

运输：低温、避光，快递免费送货上门。

染料法

探针法　

可进行相对，定量表达分析，定性分析，SNP检测等

实验报告

·电泳图   ·标准曲线 

·溶解曲线 ·扩增曲线

·完整的实验过程、试剂、仪器及分析报告

储存条件：

14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法

1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。

3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。

5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

探针法：

aqMan 探针是一种寡核苷酸探针，它的荧光与目的序列的扩增相关。它与目标序列上游引物和下游引物之间的序列配对。荧光基团连接在探针的5’ 末端，而淬灭剂则在3’ 末端。当完整的探针与目标序列配对时，荧光基团发射的荧光因与3’ 端的淬灭剂接近而被淬灭。但在进行延伸反应时，聚合酶的5’ 外切酶活性将探针进行酶切，使得荧光基团与淬灭剂分离。随着扩增循环数的增加，释放出来的荧光基团不断积累。因此荧光强度与扩增产物的数量呈正比关系。相对于染料法,Taqman探针法具有更高的特异性和准确性。

​

检测步骤：

一、 试剂的准备

从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。

设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：

试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量

荧光PCR反应液 14µL N×14µL

酶混合物 1 µL N×1 µL

总量 15 µL N×15µL

（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。

7.2 qPCR反应条件

将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。

推荐循环条件:

1循环 50℃ for 2 min

预变性 1循环 95℃ for 10 min

PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec

60℃ for 60 sec

在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

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Idiomarina│hydrocarbonoclasticus分离基物: 沉积物/TVG钙质软泥冻干物模式菌株: no应用领域: 潜在的无机污染物降解菌/分离自六价铬富集菌群培养基: 821生长条件: 28℃存储条件: 液氮超低温冻结法；-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法

Cephalosporium│chrysogenum分离基物: 根状茎斜面培养物模式菌株: no应用领域: 重楼内生真菌研究培养基: 15生长条件: 28℃存储条件: 定期移植法

Pseudomonas corrugata冻干物安全等级: 1模式菌株: no培养基: 营养肉汁琼脂： 3.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 5.0g，琼脂 15.0g，蒸馏水 1.0L，pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O，则有利于产生芽孢。pH7.0。121℃，15min。生长条件: 30℃，好氧存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法

Pleurotus│ostreatus (Jacq.) P. Kumm.斜面培养物安全等级: 1模式菌株: no培养基: 14生长条件: 25存储条件: 定期移植法

Fomes│pinicola (Sw.) Fr.分离基物: 活木斜面培养物模式菌株: no应用领域: 药用培养基: 14生长条件: 25存储条件: 定期移植法

Bacillus│cereus分离基物: 白咤蜕冻干物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 用于微生态制剂研究。培养基: CM0033生长条件: 37℃存储条件: 真空冷冻干燥法

侧耳种属: Pleurotus│lampas斜面培养物安全等级: 1模式菌株: no培养基: 0014生长条件: 25℃存储条件: 液氮超低温冻结法；矿物油法；定期移植法

Aspergillus│candidus分离基物: 土壤冻干物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 产生乳糖酶培养基: CM0014生长条件: 26C存储条件: -80℃冰箱冻结；真空冷冻干燥
操作程序：

由您提供该实验中目的基因的相关资料（如：基因名称、序列等信息），我们共同探讨服务的可能性和技术路线；

商定服务收费、付款方式、服务期限等，并签定技术服务合同。

有您提供实验所需的足够量的实验样本（100mg组织或107个细胞），本公司不接受您提供的RNA样本

PCR所需引物/探针（如果用探针法），可以由您自己提供，也可以委托本公司设计合成（费用另计）。如果由您自己提供，必须是PAGE纯化的高质量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探针。

我们进行RNA抽提、RNA定量、反转录、Real-time PCR扩增、数据分析。

产品仅用于科研提供实验报告，包括实验过程、所用仪器试剂、扩增曲线、标准曲线和相关分析数据等。